ClearSeq AMLHS je panel s molekulárními barkódy zaměřený na detekci 20 cílových genů u akutní myeloidní leukémie technologií sekvenování nové generace (NGS). Byl vyvinut ve spolupráci se špičkovými odborníky a umožní spolehlivou identifikaci mutací, insercí nebo delecí a fúzních genů ve vzorcích FFPE, krve a kostní dřeně.
Hlavní přenosti ClearSeq AMLHS:
- jedinečná citlivost: Systém molekulární barkódování unikátně označí fragmenty DNA. Výsledky potvrzují detekci minoritních alel s frekvencí pod 1 %.
- větší přesnost: Molekulární barkódy umožňují odlišit skutečné varianty od ochylek způsobených PCR. sekvenačních chyb nebo FFPE artefaktů.
- rychlejší řešení: Kompletní analýza je hotová během šesti hodin se vstupním množstvím vzorku 50 ng DNA.
Co přináší panel ClearSeq AMLHS nového:
- snížení vstupního množství vzorku z 200 ng na 50 ng DNA.
- zvýšení citlivosti - detekce alel s frekvencí pod 1 %
- vylepšené pokrytí genů CEBPA a RUNX1
- aktualizované koordináty exonů MPL a IDH2
Akutní myeloidní leukémie (AML) patří mezi nejčastější myeloidní neoplasmatická onemocnění, která postihují dospělé. Význam struktrurních chromozomálních variací v molekulární patogenezi AML byl dobře popsán1. Sekvenování nové generace (NGS) znamenalo v posledních letech revoluci ve studiu hematologických malignit a pomohlo ukázat, že mutace hrají podstatnou roli v patogenezi AML. Screening vzorků AML pomocí NGS poskytuje více detailů o genomu a je podnětné pro dlouhodobou prognózu onemocnění, když je onkogeneze podmíněna mutací v transkripčních drahách.
ClearSeq AML byl navržen ve spolupráci s dr. Robertem Ohgami a dr. Danielem Arberem ze Standfordské univerzity. ClearSeq AML se zaměřuje na 48 vybraných exonů 20 genů, u kterých byly popsány časté mutace v souvislosti s myelodysplastickým syndromem a myeloproliferativní neplazmou u pacientů s AML. Díky vysoké citlivosti ClearSeq AMLHS je možná identifikace i ojedinělých variant v heterogeních nádorových vzorcích. Překonává tak omezení vlastního sekvenovacícho procesu.
ClearSeq AMLHS využívá technologii HaloPlexHS, která funguje na principu amplikonů, metodě přípravy vzorků pro NGS, která používá molekulární barkódy. Tato technologie umožňuje snížení detekce variant alel s frekvencí nižší než 1 %2. Molekulární barkódy jsou krátké oligonukleotidové sekvence, které se přidávají k cílových molekulám ve vzorku a slouží jako unikátní značky3. Po seřazení jsou čtecí rámce obsahující molekulární barkód analyzovány a vybrány odpodvídajcí sekvence. Rozdíly v sekvencích získané v populační menšině jsou považovány za artefakty amplifikace nebo sekvenování a z analýzy vyřazeny. Typické technologie založené na amplikonech detekují alely s frekvencí mezi 3 - 5 %. Molekulární barkódy zvyšují možnost spolehlivě dekekovat malé alelické frakce mutací spojených s leukémií.
1 Betz BL, Hess JL. (2010) Arch Pathol Lab Med. 134(10): 1427-1433.
2 M.A. Quail, Yong, Gu et al. (2012) BMC Genomics. 13: 341-354. Doi:10.1186/1471-2164-13-341.
3 L. Mamanova, D.J. Turner et al. (2010) Nature Methods. 7(2): 111-118. Doi: 10.1038/nmeth.1419
Určeno pouze pro výzkum, ne pro diagnostické účely.
ClearSeq AMLHS, ILM, 16
- objednací číslo G9963A
- velikost kitu: 16 reakcí
- kit obsahuje: próby, reagencie a HaloPlex Magnetic Beads
- kit je určen pro platformu Illumina
ClearSeq AML, ILM, 96
- objednací číslo G9963B
- velikost kitu: 96 reakcí
- kit obsahuje: próby, reagencie a HaloPlex Magnetic Beads
- kit je určen pro platformu Illumina
ClearSeq AML, ION, 16
- objednací číslo G9964A
- velikost kitu: 16 reakcí
- kit obsahuje: próby, reagencie a HaloPlex Magnetic Beads
- kit je určen pro platformu ION PGM
ClearSeq AML, ION, 96
- objednací číslo G9964B
- velikost kitu: 96 reakcí
- kit obsahuje: próby, reagencie a HaloPlex Magnetic Beads
- kit je určen pro platformu ION PGM
Více informací naleznete na stránkách firmy Agilent Technologies. Pro více informací, konzultaci aplikačního specialisty nebo cenovou nabídku pište prosím na dgg [at] hpst.cz.